BJ5183感受態細胞

BJ5183感受態細胞 

運輸與保存方法：干冰運輸

保存溫度：-80°保存

操作說明:

1. 取 100μl 冰上融化的BJ5183感受態細胞，加入目的質粒并輕輕混勻，冰上 靜置 25 分鐘。BJ5183感受態細胞 10×100μl pUC19（control vector） 10pg/μl

2. 42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動會降低轉化效率。

3. 向離心管中加入 700μl 不含抗生素的無菌培養基（2YT 或 LB），混勻后 37℃，200rpm 復蘇 60 分 鐘。

4. 5000rpm 離心一分鐘收菌，留取 100μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的 2YT 或 LB 培養基上。

5. 將平板倒置放于 37℃培養箱過夜培養。

注意事項：

1. 感受態細胞在冰上融化。

2. 混入質粒時應輕柔操作。

 3. 轉化高濃度的質?？上鄳獪p少終用于涂板的菌量。

4. 誘導時，IPTG 濃度可選（0.1-2mM 均可）。

5. 為獲得需要量的蛋白，誘導時間，溫度，IPTG 濃度需實驗者優化。 Sample Induction Protocol (for reference only)

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