DNA提取試劑盒是根據氯化芐法構建的,能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基芐基化,從而破壞細胞壁的特性。
試劑盒利用了這一特性,將植物樣品凍結融解后,再使用Pipet Tip的將植物樣品在Microtube壁上數次按壓即可破壞細胞壁。
本法與傳統方法相比,省去了液氮研磨等煩瑣步驟,有利于一次性處理大量樣品。而且,本制品經過了改良,熱處理時間只需15分鐘,使用試劑盒從實驗開始至水相回收只需30分鐘時間。
得到的基因組DNA可以進行PCR擴增及限制酶處理等。劑盒純化得到的基因組DNA的長度最長可達50kb左右,平均為30kb左右,最短為100bp的DNA也可以被純化。
如需獲得更長的基因組DNA,對于哺乳動物樣品,包括組織或細胞等,可以使用哺乳動物基因組DNA抽提試劑盒。通過試劑盒獲得的總DNA,OD260/OD280的范圍通常在1.7至1.9之間。
DNA提取試劑盒主要可以分為以下幾大類:小量全血基因組DNA提取試劑盒、中量全血基因組DNA提取試劑盒、組織/細胞基因組DNA提取試劑盒、中量/大量組織/細胞基因組DNA提取試劑盒、全血/組織/細胞基因組DNA提取試劑盒、CTAB植物基因DNA提取試劑盒、新型植物基因組DNA提取試劑盒、酵母基因組DNA提取試劑盒、M13噬菌體單鏈基因組DNA提取試劑盒。
用于環介導等溫擴增(LAMP)技術檢測旋毛蟲DNA的研究
通過建立高、中、低3種不同劑量旋毛蟲感染小鼠模型,收集感染早期階段的肌肉、血液、糞便樣本進行LAMP檢測,驗證了該方法的高度敏感性和特異性,特別是對于肌肉中幼蟲密度非常低時,該技術更突顯其重要的檢測和診斷價值。
研究證明LAMP法比PCR法更敏感、快速、簡便,有望在提高人及動物旋毛蟲病的早期診斷,旋毛蟲病的現場檢測、肉類檢疫及流行病學調查等領域發揮更大作用。材料和方法:旋毛蟲蟲種、實驗動物、基因組DNA的提取本實驗所用的蟲種,旋毛蟲河南豬源株,北方旋毛蟲、偽旋毛蟲、南方旋毛蟲,來自國際旋毛蟲參考中心本實驗室昆明小鼠傳代保種。
其他人體寄生蠕蟲標本,包括似蚓蛔線蟲、蟯蟲、鞭蟲、十二指腸鉤口線蟲、華支睪吸蟲、布氏姜片蟲、日本血蟲、豬帶絳蟲、牛帶絳蟲、曼氏迭宮絳蟲,均由本實驗室保存。
6w齡健康雄性昆明小鼠(SPF級),體重20g~25g,購買并飼養于軍事醫學科學院實驗動物中心。旋毛蟲及其他樣本基因組DNA的提取采用天根公司的血液/組織/糞便基因組DNA提取試劑盒。
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